柱前衍生與柱后衍生不同之處的比較:
1、柱前衍生:在分析物經(jīng)過色譜柱前與衍生劑反應(yīng),反應(yīng)產(chǎn)物在色譜柱上實現(xiàn)分離,實際分離的是衍生產(chǎn)物,檢測的也是衍生產(chǎn)物,其優(yōu)點在于相對自由地選擇反應(yīng)條件;衍生副產(chǎn)物可進(jìn)行預(yù)處理;有較多的衍生劑可選擇;不存在反應(yīng)動力學(xué)的限制;容易允許多步反應(yīng)的進(jìn)行以及不需要復(fù)雜的儀器設(shè)備。
2、柱后衍生:分析物在色譜柱中實現(xiàn)分離后,在衍生池內(nèi)與衍生劑反應(yīng),檢測的是衍生產(chǎn)物,其優(yōu)點在于重現(xiàn)性好,影響因素少,引入物質(zhì)比較少,且分析物可以在其原有的形式下進(jìn)行分離,容易選用已有的分析方法。
柱后衍生化法將多組分樣品先注入色譜柱,按選定的色譜條件使之在色譜柱I分離,當(dāng)各個組分從色譜柱流出后,在一定的反應(yīng)條件下分別與衍生化試劑反應(yīng),生成的衍生化產(chǎn)物再進(jìn)人檢測器檢測,常用的衍生化方法有紫外衍生、熒光衍生、電化學(xué)衍生和手性衍生化等。在柱后衍生化過程中要注意流動相組成與反應(yīng)介質(zhì)的一致性,必須考慮衍生化試劑、反應(yīng)產(chǎn)物的溶解度,以及它們與流動相可能發(fā)生的副反應(yīng),同時要求被測組分從色譜柱出來后到達(dá)檢測器之間的體積要非常小,盡量減少組分色譜帶變寬而影響分離。